亨盛維嘉黃曲霉素試劑盒檢測(cè)方法采用的是美國(guó)進(jìn)口Helica試劑盒,該試劑盒質(zhì)量穩(wěn)定,準(zhǔn)確性高,回收率能達(dá)到93~106%。
該方法的測(cè)定是利用“固相直接競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫分析”的原理,具有快速、靈敏、簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn),可以短時(shí)間進(jìn)行大批量樣品的快速檢測(cè),檢出限為0.1μg/kg。也就是說樣品中如果存在黃曲霉毒素B1,可通過甲醇水抽提,它將與預(yù)先被包被于聚苯乙烯微孔板中的特異性抗體結(jié)合。隨后,加入的辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的黃曲霉毒素B1與沒有被樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中黃曲霉毒素結(jié)合的特異性抗體位點(diǎn)結(jié)合。
孵育一定時(shí)間后,倒去微孔中的溶液,洗掉未結(jié)合的物質(zhì)。然后加入TMB底物,在酶的作用下顏色變?yōu)樗{(lán)色。顏色與酶結(jié)合物的量呈正比例關(guān)系,與樣品或者標(biāo)準(zhǔn)品中黃曲霉毒素的含量呈反比例關(guān)系。
因此,隨著標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中黃曲霉毒素含量的增加,微孔顏色會(huì)逐漸變淺。加入終止液后微孔顏色由藍(lán)色變成黃色。在450nm波長(zhǎng)下讀取吸光度值,通過標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度和對(duì)應(yīng)的吸光度值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,從而確定樣品中黃曲霉毒素的含量。